Síntesis y caracterización de nanopartículas de plata para aplicaciones en inmunodetección

Las nanopartículas de plata (AgNPs) se presentan como plataformas prometedoras para el desarrollo de reactivos para inmunodetección gracias a sus propiedades superficiales. Para su adecuada aplicación, resulta fundamental controlar parámetros como el tamaño y la concentración. El objetivo de este trabajo fue sintetizar y caracterizar las propiedades morfológicas y fisicoquímicas de AgNPs para su potencial aplicación en inmunodetección mediante su conjugación con anticuerpos y peroxidasa de rábano (HRP). Las AgNPs se sintetizaron mediante la reducción química de AgNO₃ utilizando NaBH₄ como agente reductor y citrato de sodio como estabilizante ¹. Posteriormente, las AgNPs fueron concentradas mediante centrifugación a baja temperatura. La caracterización preliminar se realizó mediante espectroscopía UV-Vis y el análisis morfológico por HR-TEM. Además, se determinó el potencial Zeta (ζ) y la distribución de tamaños se evaluó mediante dispersión dinámica de luz (DLS). Por otra parte, se cuantificó Ag+ mediante un método espectrofotométrico indirecto basado en la reacción de Volhard ². Para ello, la muestra fue oxidada con HNO₃ para obtener Ag⁺. La caracterización por UV-Vis evidenció la formación de AgNPs mediante la presencia de una banda plasmónica entre 396-400 nm. Las imágenes de HR-TEM mostraron nanopartículas mayoritariamente esféricas con distribución bimodal de tamaños (4±1 nm y 14±4 nm). Los estudios de DLS indicaron una distribución polidispersa, con una población dominante en intensidad alrededor de 50 nm, atribuida a agregados o partículas de mayor tamaño. En contraste, la distribución por número mostró predominio de especies de pequeño tamaño, aunque con baja contribución relativa en masa e intensidad. El valor del│ζ│> 40 mV, indicando una elevada estabilidad coloidal. La curva de calibración presentó una linealidad aceptable (R²=0.9928) para el rango de concentraciones analizado, ajustándose a la ecuación: A= (630±10)1/M×C+(−0,018±0,004) y la [Ag⁺] en AgNPs fue igual a 1,171(3)×10⁻⁴ M. La concentración por centrifugación produjo un aumento de la absorbancia respecto a AgNPs sin centrifugar, evidenciado por una mayor intensidad del pico plasmónico entre 396-400 nm sin observarse agregados. En conjunto, los resultados demostraron que la metodología empleada permitió obtener AgNPs con elevada estabilidad coloidal y propiedades fisicoquímicas adecuadas, destacando su potencial como plataformas nanotecnológicas para aplicaciones en inmunodetección.